微小RNA-21表达在卵巢癌细胞生长和凋亡过程中的作用

娄艳辉

崔竹梅

王福玲

杨兴升

　　　　　目的探讨微小ＲＮＡ－２１（　ｍｉＲ－２１）在卵巢癌细胞生长、凋亡中的作用及调节机制。方法构建表达ｍｉＲ－２１的重组干扰载体ｐＳＩＲＥＮ－ｍｉＲ－２１质粒，采用酶切鉴定和测序法证实。实验分为３组，即转染组：卵巢癌细胞株ＯＶＣＡＲ３细胞转染重组干扰载体ｐＳＩＲＥＮ－ｍｉＲ－２１质粒；阴性对照组：ＯＶＣＡＲ３细胞转染阴性对照ｐＳＩＲＥＮ－ｍｉＲ－２１－Ｎｅｇ质粒；空白对照组：ＯＶＣＡＲ３细胞不转染质粒。采用茎环实时荧光定量逆转录（ＲＴ）－ＰＣＲ技术检测３组细胞中ｍｉＲ－２１的表达，蛋白印迹法检测３组细胞中程序性细胞死亡因子４（　ＰＤＣＤ４）蛋白的表达，四甲基偶氮唑蓝（ＭＴＴ）比色法及流式细胞仪检测３组细胞的增殖及凋亡情况。结果成功构建了表达ｍｉＲ－２１的重组干扰载体ｐＳＩＲＥＮ－ｎｉＲ－２１质粒，并经酶切鉴定和测序法证实。转染组、阴性对照组和空白对照组ＯＶＣＡＲ３细胞中ｎｉＲ－２１的表达水平分别为０．　２６±０．　０８、１．２６±０．２１和１．００，转染组明显低于阴性对照组和空白对照组，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。转染组、阴性对照组和空白对照组ＯＶＣＡＲ３细胞中ＰＤＣＤ４蛋白的灰度值分别为１４４３　±３３、８５８±１９和８４６±１６，转染组明显高于阴性对照组和空白对照组，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。转染组、阴性对照组和空白对照组ＯＶＣＡＰ３细胞增殖的Ａ值分别为０．６６１±０．０１５、０．８４８±０．　１５０、０．９３５±０．１３３，转染组明显低于阴性对照组和空白对照组，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。转染４８　ｈ后，转染组细胞的早期凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组［分别为（２５．８２１±０．　７６３）％、（０．　０１０　±０．　００３）％、（０．　２３８±０．０２３）％；Ｐ　＜０．０１］；转染７２　ｈ后，转染组细胞的早期凋亡率

和晚期凋亡率均明显高于阴性对照组和空白对照组［早期凋亡率分别为（　３０．　４８０±０．８２１）％、（７．　７９２±０．３１２）％、（７．　０３３±０．２５７）％，Ｐ＜０．　０１；晚期凋亡率分别为（３．　５５８±０．２１１）％、（１．５５７±０．　０６７）％、（１．　０４９±０．　０２８）％，Ｐ＜０．０５］。结论ｍｉＲ－２１参与调节卵巢癌细胞的生长和凋亡过程，可能通过调控ＰＤＣＤ４蛋白的表达而发挥作用。

卵巢肿瘤；　　微ＲＮＡｓ；　　ＲＮＡ结合蛋白质类；凋亡调节蛋白质类；细胞系，肿瘤；

细胞凋亡

ＬＯＵ　Ｒｏｌｅ　ｏｆ　ｍｉｃｒｏＲＮＡ－２１　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｏｆ　ｏｖａｒｉａｎ　ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｃｅｌｌｓ　Ｙａｎ－ｈｕｉ　＊ＣＵｉ　Ｚｈｕ－ｍｅｉ　ＷＡＮＧ　Ｆｕ－ｌｉｎｇ　ＹＡＮＧ　Ｘｉｎｇ－ｓｈｅｎｇ　＊Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｙ，　Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　

ｏｆ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，　Ｑｉｎｇｄａｏ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，　Ｑｉｎｇｄａｏ　２６６００１，　Ｃｈｉｎａ　

　　　　　　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｒｏｌｅ　ａｎｄ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　ｍｉｃｒｏＲＮＡ－２１　（ｍｉＲ－２１）　ｉｎ　ｔｈｅ　

ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｏｆ　ｏｖａｒｉａｎ　ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｃｅｌｌｓ．　Ｍｅｔｈｏｄｓ　　Ａ　ｓｈｏｒｔ－ｈａｉｒｐｉｎ　ＲＮＡ　ｓｐｅｃｉｆｉｃａｌｌｙ　

ｔａｒｇｅｔｉｎｇ　ｍｉＲ－２１　ｐｌａｓｍｉｄ　ｗａｓ　ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ，　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ　ｗａｓ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ｂｙ　ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ　ｅｎｄｏｎｕｃｌｅａｓｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ａｎｄ　ＤＮＡ　ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ．　Ｔｈｒｅｅ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｇｒｏｕｐｓ　ｗｅｒｅ　ｉｎｃｌｕｄｅｄ，　ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ　ｇｒｏｕｐ　（ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ　ｗｉｔｈ　

ｐＳＩＲＥＮ－ｍｉＲ－２１　），　ｎｅｇａｔｉｖｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ　（　ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｐＳＩＲＥＮ－ｍｉＲ－２１－ｎｅｇ）　ａｎｄ　ｂｌａｎｋ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ　（ｗｉｔｈｏｕｔ　ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ　ｐｌａｓｍｉｄ　）．　Ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｍｉＲ－２１　ｗａｓ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ｓｔｅｍ－ｌｏｏｐ　ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ　ｒｅｖｅｒｓｅ　

ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　（ＲＴ）－ＰＣＲ　ｉｎ　ＯＶＣＡＲ３　ｃｅｌｌｓ　，ａｎｄ　ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｃｔ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ　ｃｅｌｌ　ｄｅａｔｈ　４　（　ＰＤＣＤ４　）　ｐｒｏｔｅｉｎ．　Ｔｅｔｈｙｌ　ｔｈｉａｚｏｌｙｌ　ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ　（ＭＴＴ）　ａｎｄ　ｆｌｏｗ　ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．　Ｒｅｓｕｌｔｓ　　Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ　ｐｌａｓｍｉｄ　（ｐＳＩＲＥＮ－ｍｉＲ－２１）　ｗａｓ　ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ　ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙ　ａｎｄ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ｂｙ　ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ　ｅｎｄｏｎｕｃｌｅａｓｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ａｎｄ　ＤＮＡ　ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ．　Ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　ｍｉＲ－２１　ｉｎ　ｃｅｌｌｓ　

１０．　３７６０／ｃｍａ．　ｊ．　ｉｓｓｎ．　０５２９－５６７ｘ．　２０１１．　０９．　０１０

　　作者单位：２６６００１　青岛大学医学院附属医院妇科（娄艳辉、崔竹梅、王福玲）；山东大学齐鲁医院妇产科

（杨兴升）

万方数据ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ，　ｎｅｇａｔｉｖｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ａｎｄ　ｂｌａｎｋ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ　ｗａｓ　０．２６　±　０．０８，　１．２６　±　０．２１　　ａｎｄ　１．００　

ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．　Ｔｈｅ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　ｍｉＲ－２１　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｅｌｌｓ　ｉｎ　ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ　ｇｒｏｕｐ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｌｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　

ｎｅｇｔｉｖｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ａｎｄ　ｂｌａｎｋ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ　＜０．　０１　）．　Ｔｈｅ　ｇｒａｙ　ｓｃａｌｅ　ｏｆ　ＰＤＣＤ４．　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｗａｓ　１４４３　±３３，８５８　±　１９　ａｎｄ　８４６　±　１６　ｉｎ　ｔｈｅ　ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ　ｇｒｏｕｐ，　ｎｅｇａｔｉｖｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ａｎｄ　ｂｌａｎｋ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．　Ｔｈｅ　ｖａｌｕｅ　ｏｆ　ＰＤＣＤ４　ｉｎ　ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ　ｇｒｏｕｐ　ｗａｓ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｏｔｈｅｒ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐｓ，　ａｎｄ　ｔｈｅｒｅ　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ａｍｏｎｇ　ｔｈｅｍ（　Ｐ　＜０．　０１　）．　Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｃａｌ　ｄｅｎｓｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｅｌｌｓ　ｉｎ　ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ　ｇｒｏｕｐ　ｗａｓ　０．　６６１　±０．　０１５，ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｌｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｉｎ　ｔｗｏ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐｓ　（０．　８４８　±　０．　１５０　ｆｏｒ　ｎｅｇａｔｉｖｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ，　０．　９３５　±　０．　１３３　ｆｏｒ　

ｂｌａｎｋ　ｃｏｎｔｒｏｌ，　　Ｐ　＜　０．　０１　）．　Ｆｏｒｔｙ－ｅｉｇｈｔ　ｈｏｕｒｓ　ａｆｔｅｒ　ｔｒａｎｆｅｃｔｉｏｎ，　ｔｈｅ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｖｉａｂｌｅ　ａｐｏｐｔｏｔｉｃ　ｃｅｌｌ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｎｅｇａｔｉｖｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ａｎｄ　ｂｌａｎｋ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ　［　（２５．８２１　±　０．　７６３　）％　ｖｓ．　　（０．　０１０　±　

０．　００３　）　％　ｖｓ．　（０．　２３８　±　０．　０２３）　％　；　Ｐ　＜　０．　０１　］　；７２　ｈｏｕｒｓ　ａｆｔｅｒ　ｔｒａｎｆｅｃｔｉｏｎ，　ｔｈｅ　ｒａｔｅｓ　ｏｆ　ｖｉａｂｌｅ　ａｐｏｐｔｏｔｉｃ　ｃｅｌｌ　

ａｎｄ　ｎｅｃｒｏｔｉｃ　ｃｅｌｌ　ｗｅｒｅ　ａｌｌ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｅ　ｔｗｏ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐｓ　［　ｔｈｅ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｖｉａｂｌｅ　ａｐｏｐｔｏｔｉｃ　ｃｅｌｌ　ｗａｓ　（　３０．　４８０　±

０．　８２１　）　％，　（　７．　７９２　±　０．　３１２　）　％　ａｎｄ　（　７．　０３３　±　０．　２５７　）　％　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ　（　Ｐ　＜　０．　０１　）　；　ｔｈｅ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｎｅｃｒｏｔｉｃ　ｃｅｌｌ　

ｗａｓ　（３．５５８　±０．２１１）％，　（１．５５７　±０．０６７）％　ａｎｄ　（１．０４９　±０．０２８）％，　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ　（Ｐ＜０．　０１）］．

Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　　ｍｉＲ－２１　ｍｉｇｈｔ　ｐｌａｙ　ａｎ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｒｏｌｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｏｆ　ｏｖａｒｉａｎ　ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ　

ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｃｅｌｌｓ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｎｅｇａｔｉｖｅｌｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＰＤＣＤ４．

Ｏｖａｒｉａｎ　ｎｅｏｐｌａｓｍｓ；　　ＭｉｃｒｏＲＮＡｓ；　　　ＲＮＡ－ｂｉｎｄｉｎｇ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　；　　　Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ　

ｐｒｏｔｅｉｎｓ；　　Ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅ，ｔｕｍｏｒ；　　　Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　

万方数据６８６

万方数据１１１１拦！！上！ｌ＇上自！！墨！！！！刍：！』！笙！鱼盔垡！！到竺！ｉ！！』！！型！！：！！！！！！！！！！！！，！！Ｉ！！＝！！！！：！！！！！：ｙ！！：！垒：盟！！：！参数点罔，将实验样本巾正常、坏死、凋产细胞【又分开，‘一期（或晚期）细胞凋广，簪ｒｆｌ仪器ｒ１动分析后凄取。ｉ、统计学方法采ＪＨＳＰＳＳ１３．０软件进行统计学处理。，实验数据均以戈±ｓ表示，采川ｔ检验。结果一、重组干扰载体的鉴定及纯化ｐＳＩＲＥＮ．ｍｉＲ－２１质粒经ＢａｍＨＩ、融ＬⅡ双酶切后得到２６３ｂｐ的片段，经ＥｃｏＲＩ、ｎｇｔＩＩ双酶切后得到３２２ｂｐ的片段；而ｐＳＩＲＥＮ－ｍｉＲ．２ｌ质粒无论是ＢａｍＨＩ单酶切还是ＥｃｏＲＩ单酶切，均无片段被切出，初步证明重组干扰载体ｐＳＩＲＥＮ—ｍｉＲ．２ｌ质粒构建成功。见图１。经酶切鉴定后，将ｐＳＩＲＥＮ．ｍｉＲ一２１质粒样品送美国ｌｎｖｅｔｒｏｇｅｎ公司测序，确定各重组干扰载体构建成功。提取ｐＳＩＲＥＮ．ｍｉＲ．２１质粒并纯化，紫外分光光度计检测显示，以：砷／／４：舯的比值均在１．８—２．０之间，证实所测质粒纯度较高，适于细胞转染使用。ｂｐ７５００５０００５００２５０Ｉ）、、ｍＬ物２：ｌｌｄｍｌｌＩ．ＩＣ９１．ＩＪ“胁Ｉ／Ｊ３：“ｒ，片Ｂｇｌ，ＩＩ议胁ｉ』Ｊ４：Ｂ，ｍ＋ｌｌＩ』ｐ矾ｌ』Ｊ５：“ｎ”ＩＩ丫Ｊ胁ｆ』Ｊｎ：术？｝胁ＩＪＪ图ｌｐＳＩＲＥＮ・ｍｉＲ－２ｌ质粒的酶切鉴定结果二、３组ＯＶＣＡＲ３细胞巾ｍｉＲ一２Ｉ的表达转染组、阴性对照组和李白对照组ＯＶＣＡＲ３细胞巾ｍｉＩｔ．２ｌ的表达水平分别为０．２６±０．０８、１．２６±０．２１和１．００，转染组明显低于阴性对照组和空白对照组，篾肄有统汁学意义（Ｐ＜０．ＯＩ）；而阴性对照组与窄白对照组比较，差蚌无统计学意义（Ｐ＞０．０５），，ｉ、３组ＯＶＣＡＲ３细胞巾ＰＤＣＤ４蛋白的表达转染组、阴性对照组和空ｎ对照组ＯＶＣＡＲ３细胞｜＿１１ＰＤＣＤ４蛋白的灰度值分别为１４４３士３３、８５８±１９和８４６±１６．转染组明娃高＿Ｆ｜｛ｆｊ性对照组和空白对照组，差异有统ｉ：ｔ“１；ｆ：意义（Ｐ＜０．０１）；而阶陀对照万方数据组与窄门对照组比较，差异尤统计学意义（Ｐ＞０．０５）。见恪ｌ２。Ｐ∞附ｐ１“ｎｌ：ｆＩ’ｉ川１㈦ｊ２：…＂《州ｆ｛川３：转ｒ』ｌ＝川图２蛋白印迹法检测３组ＯＶＣＡＲ３细胞中ＰＤＣＩＢ蛋内的表达四、３组ＯＶＣＡＲ３细胞的增殖情况转染组、阴性对照组和空白对照组ＯＶＣＡＲ３细胞的Ａ值分别为Ｏ．６６ｌ±０．０１５、０．８４８±０．１５０、０．９３５±０．１３３，转染组明显低于阴性对照组和空白对照组，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）；阴性对照组与空白对照组比较，差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。转染组、阴性对照组ＯＶＣＡＲ３细胞的增殖抑制率分别为（２９．４±１．４）％、（９．０±１．３）％，转染组明显高于阴性对照组，差异有统计学意义（Ｐ＜０．ＯＩ）。五、３组ＯＶＣＡＲ３细胞的凋亡率转染４８ｈ后，转染组细胞的早期凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组（Ｐ＜０．０１）；而阴性对照组与空白对照组细胞早期凋亡率比较，差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）；各组细胞的晚期凋亡率比较，差异也无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。转染７２ｈ后，转染组细胞的早期凋１Ｌ＝率和晚期凋亡率均明显高于阴性对照组和空白对照组（Ｐ＜０．０５）；而阴性对照组与空白对照组细胞的早期凋亡率和晚期凋亡率分别比较，差异均无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。见表ｌ。讨论一、ｍｉＲＮＡ的生物学特性及其与肿瘤的关系ｍｉＲＮＡ是近年研究发现的一组不编码蛋白质的短序列ＲＮＡ，能够与多种ｍＲＮＡ分子序列互补结合，调节个体发育、ｆ：细胞的分化、细胞增殖与凋ｆ以及造ｍ等多种生物学过程”剖。细胞失控性增殖、侵袭和转移是恶性肿瘤的主要特征。越来越多的研究表明，许多与细胞周期、凋亡、迁移等杆｛火的癌基闪和抑癌基闪都可能受到ｍｉＲＮＡ的调控，提示ｍｉＲＮＡ可能在恶性肿瘤的发生和发展过程巾发挥着二｛Ｅ常重要的作用【７引。ｍｉＲ．２ｌ是实体肿瘤ｌ｝１最常见的过度表达的ｍｉＲＮＡ之～，通过靶向调节多种抑癌基冈，促进细胞增殖、对抗细胞凋亡，是肿瘤细胞万方数据＠＠［　１　］Ｃｈａｎ　ＳＨ，　Ｗｕ　ＣＷ，　Ｌｉ　ＡＦ，　ｅｔ　ａｌ．　ｍｉＲ－２１　ｍｉｃｒｏＲＮＡ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　　　　　　　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　　ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ　　ａｎｄ　　ｉｔｓ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ．　

　　　　　　Ａｎｆｉｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，２００８，２８：９０７－９１　１．

＠＠［２］黄关立，张筱骅，郭贵龙，等．微ＲＮＡ－２１在乳腺浸润性导管癌　　　　中的表达及与磷酸酶张力蛋白基因的相关分析．中华医学杂

　　　　志，２００８，８８：２８３３－２８３７．

＠＠［３］娄艳辉，扬兴升，王福玲，等．ＭｉＲ－２１在上皮性卵巢癌组织中　　　　的表达及临床意义．南方医科大学学报，２０１０，３０：６０８－６１０．

＠＠［４］　Ｆｒａｎｋｅｌ　ＬＢ，　Ｃｈｒｉｓｔｏｆｆｅｒｓｅｎ　ＮＲ，　Ｊａｃｏｂｓｅｎ　Ａ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ　

　　　　　　ｃｅｌｌ　ｄｅａｔｈ　４　（　ＰＤＣＤ４　）　ｉｓ　ａｎ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｔａｒｇｅｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　

　　　　　　ｍｉｃｒｏＲＮＡ　ｍｉＲ－２１　ｉｎ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌｓ．　Ｊ　Ｂｉｏｌ　Ｃｈｅｍ，　２００８，

　　　　　　２８３　：　１０２６－１　０３３．

＠＠　［５］　　Ｂａｒｔｅｌ　ＤＰ．　ＭｉｃｒｏＲＮＡｓ：　ｇｅｎｏｍｉｃｓ，　ｂｉｏｇｅｎｅｓｉｓ，　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ，　ａｎｄ　

　　　　　　　Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，　２００３，２２　：　３７１２　－３７２０．

＠＠［１４］　　Ｗａｎｇ　Ｘ，　Ｗｅｉ　Ｚ，　Ｇａｏ　Ｆ，　ｅｔ　ａｌ．　　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ　　　　　　　　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ　ｏｆ　ＰＤＣＤ４　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ　ｏｖａｒｉａｎ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ．　

　　　　　　　ｆｕｎｃｔｉｏｎ．　Ｃｅｌｌ　，２００４，１１６：２８１－２９７．

＠＠　［６］　Ｘｕ　Ｐ，　Ｇｕｏ　Ｍ，　Ｈａｙ　ＢＡ．　ＭｉｃｒｏＲＮＡｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｅｌｌ　

　　　　　　　Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ　，２００８，２８：２９９１－２９９６．

＠＠［１５］　　Ｌｕ　Ｚ，　Ｌｉｕ　Ｍ，　Ｓｔｒｉｂｉｎｓｋｉｓ　Ｖ，　ｅｔ　ａｌ．　ＭｉｃｒｏＲＮＡ－２１　ｐｒｏｍｏｔｅｓ　ｃｅｌｌ　　　　　　　　ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｂｙ　ｔａｒｇｅｔｉｎｇ　ｔｈｅ　ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ　ｃｅｌｌ　ｄｅａｔｈ　４　ｇｅｎｅ．　

　　　　　　　ｄｅａｔｈ．　Ｔｒｅｎｄｓ　Ｇｅｎｅｔ　，２００４，２０　：　６１７　－６２４．

＠＠　［７］　Ｃａｌｉｎ　ＧＡ，　Ｃｒｏｃｅ　ＣＭ．　ＭｉｃｒｏＲＮＡ　ｓｉｇｎａｔｕｒｅｓ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｃａｎｃｅｒｓ．　

　　　　　　　Ｎａｔ　Ｒｅｖ　Ｃａｎｃｅｒ，２００６，６：８５７－８６６．

＠＠　［８］　　Ｅｓｑｕｅｌａ－Ｋｅｒｓｃｈｅｒ　Ａ，　Ｓｌａｃｋ　ＦＪ．　Ｏｎｃｏｍｉｒｓ　－　ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ　ｗｉｔｈ　ａ　ｒｏｌｅ　

　　　　　　　Ｏｎｃｏｇｅｎｅ　，２００８，２７：４３７３－４３７９．

＠＠［　１６］　　ＬａＲｏｎｄｅ－ＬｅＢｌａｎｃ　Ｎ，　Ｓａｎｔｈａｎａｍ　ＡＮ，　Ｂａｋｅｒ　ＡＲ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ　　　　　　　　ｂａｓｉｓ　ｆｏｒ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｔｕｍｏｒ　ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ　Ｐｄｃｄ４．

　　　　　　　ｉｎ　ｃａｎｃｅｒ．　Ｎａｔ　Ｒｅｖ　Ｃａｎｃｅｒ，２００６，６：２５９－２６９．

＠＠　［９］　　Ｃｈａｎ　ＪＡ，　　Ｋｒｉｃｈｅｖｓｋｙ　ＡＭ，　　Ｋｏｓｉｋ　　ＫＳ．　　ＭｉｃｒｏＲＮＡ－２１　　ｉｓ　ａｎ　　　　　　　　ａｎｔｉａｐｏｐｔｏｔｉｃ　ｆａｃｔｏｒ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ　ｃｅｌｌｓ．　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，

　　　　　　　　Ｍｏｌ　Ｃｅｌｌ　Ｂｉｏ１，２００７，２７　：　１４７－１５６．

＠＠［１７］　　Ｓｈｉｏｔａ　Ｍ，　ｌｚｕｍｉ　Ｈ，　Ｔａｎｉｍｏｔｏ　Ａ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ　ｃｅｌｌ　ｄｅａｔｈ　

　　　　　　　　ｐｒｏｔｅｉｎ　４　ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｅｓ　Ｙ－ｂｏｘ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ－１　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｖｉａ　ａ　　　　　　　　ｄｉｒｅｃｔ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　Ｔｗｉｓｔｌ　　ｔｏ　ｓｕｐｐｒｅｓｓ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌ　ｇｒｏｗｔｈ．

　　　　　　　２００５，６５：６０２９－６０３３．

＠＠［１０］　　Ｍｅｎｇ　Ｆ，　Ｈｅｎｓｏｎ　Ｒ，　Ｗｅｈｂｅ－Ｊａｎｅｋ　Ｈ，　ｅｔ　ａｌ．　　ＭｉｃｒｏＲＮＡ－２１　

　　　　　　　ｒｅｇｕｌａｔｅｓ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ＰＴＥＮ　ｔｕｍｏｒ　ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ　ｇｅｎｅ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　

　　　　　　　　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ　，２００９，６９：３１４８－３１５６．

＠＠［１８］　　Ｌｏｕ　Ｙ，　Ｙａｎｇ　Ｘ，　Ｗａｎｇ　Ｆ，　ｅｔ　ａｌ．　ＭｉｃｒｏＲＮＡ－２１　ｐｒｏｍｏｔｅｓ　ｔｈｅ　ｃｅｌｌ　

　　　　　　　　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，　ｉｎｖａｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｍｉｇｒａｔｉｏｎ　ａｂｉｌｉｔｉｅｓ　ｉｎ　ｏｖａｒｉａｎ　ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ　

　　　　　　　ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ　ｃａｎｃｅｒ．　Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ　，２００７，１３３：６４７－６５８．＠＠［１１　］　Ｓｈｉｂａｈａｒａ　Ｋ，　Ａｓａｎｏ　Ｍ，　Ｉｓｈｉｄａ　Ｙ，　ｅｔ　ａｌ．　　Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　ｎｏｖｅｌ　　　　　　　　ｍｏｕｓｅ　ｇｅｎｅ　ＭＡ－３　ｔｈａｔ　ｉｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｕｐｏｎ　ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ　ｃｅｌｌ　ｄｅａｔｈ．　

　　　　　　　　ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＰＴＥＮ　ｐｒｏｔｅｉｎ．　Ｉｎｔ　

　　　　　　　Ｇｅｎｅ，　１９９５，１６６：２９７－３０１．

＠＠［１２］　Ｃｈｅｎ　Ｙ，　Ｋｎ（ｏ）ｓｅｌ　Ｔ，　　Ｋｒｉｓｔｉａｎｓｅｎ　Ｇ，　ｅｔ　ａｌ．　　Ｌｏｓｓ　ｏｆ　ＰＤＣＤ４　　　　　　　　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　　ｉｎ　　ｈｕｍａｎ　　ｌｕｎｇ　　ｃａｎｃｅｒ　　ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ　　ｗｉｔｈ　　ｔｕｍｏｕｒ　

　　　　　　　Ｊ　Ｍｏｌ　Ｍｅｄ，２０１０，２６：８１９－８２７．

　２０１１－０６－２３

　　　　　　　ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ．　Ｊ　Ｐａｔｈｏｌ，２００３　，２００　：６４０－６４６．＠＠［１３］　　Ｙａｎｇ　ＨＳ，　Ｋｎｉｅｓ　ＪＬ，　Ｓｔａｒｋ　Ｃ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｐｄｃｄ４　ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ　ｔｕｍｏｒ　　　　　　　　ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ　ｉｎ　ＪＢ６　ｃｅｌｌｓ　ｂｙ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ　ＡＰ－１　ｔｒａｎｓａｃｔｉｖａｔｉｏｎ．

万方数据微小RNA-21表达在卵巢癌细胞生长和凋亡过程中的作用

作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：

娄艳辉， 崔竹梅， 王福玲， 杨兴升， LOU Yan-hui， CUi Zhu-mei， WANG Fu-ling， YANG Xing-sheng

娄艳辉,崔竹梅,王福玲,LOU Yan-hui,CUi Zhu-mei,WANG Fu-ling(266001,青岛大学医学院附属医院妇科)， 杨兴升,YANG Xing-sheng(山东大学齐鲁医院妇产科)中华妇产科杂志

Chinese Journal of Obstetrics and Gynecology2011,46(9)

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